High throughput analysis of single cells by combined flow cytometry and cell imaging

Flowcytometrie is een niet meer weg te denken toepassing bij het karakteriseren van grote hoeveelheden cellen. Door de mogelijkheid verschillende parameters tegelijkertijd te meten kunnen zeer kleine aantallen cellen geselecteerd worden uit grote populaties, zoals stamcellen in het bloed. Een nadeel van de analysemogelijkheden van de flowcytometer is dat het mogelijk is om te analyseren of een bepaald eiwit op of in de cel zit, maar dat het onmogelijk is om aan te tonen waar precies in de cel een eiwit zit en of het eiwit in een bepaald organel zit, zoals een kern of een lysosoom, en of het eiwit op dezelfde plek zit als een ander eiwit, of juist niet. Deze vragen zijn op te lossen met microscopie, maar dan slechts met kleine aantallen cellen, of met biochemische technieken zoals coprecipitatie, waarbij geen informatie over individuele cellen beschikbaar is. Hierdoor blijft het moeilijk om celsignalering, kerntranslocatie, cocapping e.d. reproduceerbaar te bestuderen op grote hoeveelheden cellen. Dit kan wel met de Amnis Imagestream waarin de kwantitatieve analysemogelijkheid van een flowcytometer gecombineerd is met de resolutie van een microscoop. Van elke cel wordt bij analyse een foto gemaakt, in helder veld en met fluorescentiesignaal, en deze data worden gebruikt om precies na te gaan waar in de cel bepaalde moleculen zich bevinden, met welke moleculen dit samenvalt, hoe dit verandert bij het activeren van de cel enzovoort. Dit is van grote waarde bij het onderzoek binnen de immunologie en oncologie, maar ook toepassingen binnen bloedcelontwikkeling hebben baat bij deze machine. Diverse onderzoeksgroepen binnen het VUmc hebben de Imagestream omarmd en gebruiken de machine intensief voor hun onderzoek.