Pathofysiologie van chronische longschade bij prematuren bestudeerd met 3D-celkweek als alternatief voor dierproeven.
Producten
Verslagen
Eindverslag
In dit project is voor de eerste keer succesvol een 3D-celkweek systeem van de alveolo-cappilaire barriere van de long geïmplementeerd en gekarakteriseerd, waarmee de wondgenezing in de longblaasjes bestudeerd kan worden. Dit in vitro systeem kan, door de aanwezigheid van verschillende celtypes naar analogie van de in vivo structuur, ook meer fysiologisch relevante informatie geven dan de voorheen bestudeerde monoculturen. Hierdoor biedt het dus een alternatief voor dierproeven en kan het gebruik ervan terugdringen.
Om meer inzicht te krijgen in het schadeherstel in de longen van prematuur pasgeborenen is er in de afgelopen periode een 3D celkweeksysteem opgezet en is het 2D celkweeksysteem geoptimaliseerd. Er zijn succesvol wondgenezings experimenten uitgevoerd met deze systemen en de data analyse is geautomatiseerd. Bij deze wondgenezings experimenten zijn een aantal surfactant eiwitten en groeifactoren, die al dan niet geasocieerd zijn met deze surfactant eiwitten, getest. Hierbij zijn een aantal targets geïdentificeerd waar verder onderzoek naar is gedaan om de wijze van inhibitie/promotie op wondgenezing te analyseren. Tevens zijn er pilots uitgevoerd om de verschillen te verklaren die zichtbaar zijn bij de wondgenezing tussen het 3D en 2D celkweeksysteem.
Er is een start gemaakt om het surfactant metabolisme m.b.v. CARS microscopie te bestuderen. Hierbij wordt er eerst gekeken naar een eiwit dat we onlangs geidentificeerd hebben. Dit eiwit zorgt er namelijk voor dat er lipid-achtige structuren onstaan in het celkweekmodel.
Er is een studie gedaan naar de koppeling van TGF-b aan een van de surfactant eiwitten en dit wordt nog uitgebreid naar andere surfactant eiwitten. Hierbij wordt ook de biologische activiteit na koppeling bekeken door het opzetten van ELISA’s voor downstream effecten in de pathway.