Two-photon fluorescence microscopy applications in immunology, oncology and neurosciences
Verslagen
Eindverslag
Driedimensionale, in vivo microscopie is een belangrijk instrument bij biomedisch onderzoek, waarbij in intact weefsels levende cellen met hoge resolutie kunnen worden bestudeerd. Door specifieke labelingtechnieken kunnen individuele bio-moleculen en structuren in cellen worden aangetoond met hoge resolutie op driedimensionaal niveau. Het gebruik van two-photon microscopie biedt veel voordelen boven confocale laser-scan microscopie omdat veel dieper in het weefsel kan worden doorgedrongen door het gebruik van de voor two-photon microscopie gebruikelijke NIR lasers (near Infra-red). Doordat bovendien de excitatie van de fluoresentie alleen optreedt in het focuspunt, is er veel minder uitdoven en toxiciteit waarneembaar in niet aangestraalde delen van het weefsel, terwijl bij confocale microscopie uitdoving over het gehele belichte gebied optreedt. Deze voordelen maken two-photon microscopie bijzonder geschikt voor bestuderen van levende cellen in weefsel. Met het in deze investeringssubsidie gebruikte two-photon systeem wordt gebruikt gemaakt van een pulserende laser en een zg. beam splitter, waardoor het mogelijk is om grote volumina weefsels te onderzoeken dan hiervoor mogelijk was. De microscoop met de optische bank is opgebouwd in de proefdierfaciliteiten van het VU medisch centrum, waardoor het toegankelijk is gemaakt voor alle onderzoekers die met diermodellen werken.